Eritrocitos humanos como biomodelo farmacológico de citoprotección antioxidante para la evaluación de nuevas alternativas terapéuticas en pacientes con COVID-19 / Human erythrocytes as pharmacological biomodel of antioxidant cytoprotection for the evaluation of new therapeutic alternatives in patients with COVID-19

Introducción: El estrés oxidativo puede afectar las membranas biológicas de diferentes tipos celulares en el organismo, lo cual se ha evidenciado en los daños a los tejidos y órganos de pacientes con COVID-19, por lo cual las investigaciones recientes están relacionadas con la búsqueda de fármacos citoprotectores y antioxidantes que minimicen estos daños. Objetivo: Evaluar los eritrocitos humanos como biomodelo farmacológico de citoprotección antioxidante. Métodos: Se evaluó el modelo de citotoxicidad en eritrocitos inducido por peróxido de hidrógeno y se valoró el sistema de diagnóstico propuesto en un ensayo de citoprotección en eritrocitos, con el empleo del ácido ascórbico como sustancia de referencia. Resultados: Para la concentración de eritrocitos utilizada se logró un modelo de citotoxicidad a la concentración de 10 mM de peróxido a los 30 minutos de incubación. La sustancia de referencia empleada no mostró signos de citotoxicidad en el test de hemólisis. En el ensayo de citoprotección se evidenció un efecto farmacológico del referente, con un valor del índice de citoprotección de 12,71 µg/mL. El estudio de microscopía óptica mostró daños morfológicos severos en los eritrocitos tratados con peróxido de tipo esferocitos, equinocitos y esferoequinocitos, que disminuyeron significativamente en presencia de dicha sustancia de referencia. Conclusiones: El biomodelo farmacológico propuesto puede ser empleado en la evaluación de nuevas alternativas terapéuticas con propiedades citoprotectoras antioxidantes para el tratamiento de pacientes con COVID-19.

Introduction: The oxidative stress can affect the biological membranes of different cellular types in the organism, which has been evidenced in the damages to the tissues and organs of patients with COVID-19, reason why the recent investigations are related to the search of cytoprotector and antioxidant drugs that minimize these damages. Objective: To evaluate the human erythrocytes as pharmacological biomodel of antioxidant cytoprotection. Methods: The cytotoxicity pattern was evaluated in erythrocytes induced by peroxide of hydrogen and the system of diagnosis proposed was valued in a cytoprotection assay in erythrocytes, with the use of ascorbic acid as reference substance. Results: For the concentration of erythrocytes used a cytotoxicity model was achieved to the concentration of 10 mM of peroxide at 30 minutes of incubation. The substance of reference used didn't show cytotoxicity signs in the hemolysis test. In the cytoprotection assay a pharmacological effect of the referent was evidenced, with a value of the cytoprotection index of 12.71 µg/mL. The study of optic microscopy showed severe morphological damages in the erythrocytes treated with peroxide of spherocytes, echinocytes and spheroechinocytes type that significantly diminished in presence of this reference substance. Conclusions: The proposed pharmacological biomodel can be used in the evaluation of new therapeutic alternatives with antioxidant cytoprotector properties for the treatment of patients with COVID-19.

Evaluación in vivo de la pirogenicidad de bioproductos fúngicos con potencial prebiótico / In vivo pyrogenicity evaluation of fungal bioproducts with prebiotic potential / Avaliação in vivo da pirogenicidade de bioprodutos fúngicos com potencial prebiótico

RESUMEN Introducción: Los productos naturales con actividad farmacológica requieren de evaluaciones preclínicas que justifiquen su empleo sobre una base científica. El ensayo de pirógenos es una prueba dentro de la Farmacología de Seguridad que se realiza para determinar la presencia de endotoxinas y constituye un método valioso, para demostrar la seguridad de bioderivados con potencial prebiótico en el campo de la inmunonutrición. Objetivo: Evaluar la pirogenicidad de bioproductos fúngicos de Pleurotus ostreatus (extractos acuosos del micelio y cuerpos fructíferos) y un biopreparado de levadura Kluyveromyces marxianus, empleando el ensayo de pirógenos en conejos Nueva Zelanda. Método: Se ensayaron concentraciones de 1,0 y 10,0 mg/mL de cada muestra por vía endovenosa en dosis de 0,5 y 5,0 mg/kg de peso. El diseño experimental cumplió las buenas prácticas de laboratorio según lo establecido por el International Council for Laboratory Animals Science y se realizó de acuerdo a los procedimientos normalizados de trabajo del Centro de Toxicología y Biomedicina, Santiago de Cuba. Resultados: Los extractos de Pleurotus ostreatus y el biopreparado de levadura (0,5 mg/kg) no mostraron signos de pirogenicidad. En los resultados del biopreparado (5,0 mg/kg), los valores de temperatura caen en un rango de incertidumbre, según la Farmacopea de Estados Unidos (USP) y se sugirió repetir el estudio. Conclusiones: Los extractos de Pleurotus ostreatus y el biopreparado de Kluyveromyces marxianus (0,5 mg/kg) no indujeron un aumento de temperatura significativo en los animales, lo cual sugiere que en estos bioproductos no existen niveles de endotoxinas que puedan provocar pirogenicidad.

ABSTRACT Introduction: Natural products with pharmacological activity require preclinical evaluations to justify their uses scientifically. The pyrogen assay is a safety pharmacology test performed to determine the presence of endotoxins and it is a valuable method to demonstrate the bio-derivative products safety and their prebiotic potential in the field of immunonutrition. Objective: To evaluate the pyrogenicity of fungal bioproducts from Pleurotus ostreatus (aqueous extracts from mycelium and fruiting bodies) and a biopreparation from Kluyveromyces marxianus yeast, using a pyrogen assay in New Zealand rabbits. Method: Concentrations of 1.0 and 10.0 mg/mL of each sample were tested intravenously at doses of 0.5 and 5.0 mg/kg body weight. The experimental design complied with good laboratory practices as established by the International Council for Laboratory Animal Science and was carried out according to the standard work procedures of the Centro de Toxicología y Biomedicina, Santiago de Cuba. Results: Pleurotus ostreatus extracts and the yeast biopreparation (0.5 mg/kg) showed no signs of pyrogenicity. In the biopreparation results (5.0 mg/kg), temperature values fall in the uncertainty range according to the United States Pharmacopoeia (USP), and therefore it was suggested to repeat the study. Conclusions: Pleurotus ostreatus extracts and Kluyveromyces marxianus biopreparation (0.5 mg/kg) did not induce a significant temperature increase in the animals, thereby suggesting that there are no endotoxin levels in such bioproducts that could cause pyrogenicity.

RESUMO Introdução: Produtos naturais com atividade farmacológica requerem avaliações pré-clínicas que justifiquem seu uso em bases científicas. O ensaio de pirogênio é um teste dentro da Farmacologia de Segurança que é realizado para determinar a presença de endotoxinas e é um método valioso para demonstrar a segurança de bioderivados com potencial prebiótico no campo da imunonutrição. Objetivo: Avaliar a pirogenicidade de bioprodutos fúngicos de Pleurotus ostreatus (extratos aquosos do micélio e corpos de frutificação) e de uma biopreparação da levedura Kluyveromyces marxianus, utilizando o ensaio pirogênico de coelho da Nova Zelândia. Método: Concentrações de 1,0 e 10,0 mg/mL de cada amostra foram testadas por via intravenosa nas doses de 0,5 e 5,0 mg/kg de peso. O desenho experimental obedeceu às boas práticas laboratoriais estabelecidas pelo Conselho Internacional para a Ciência dos Animais de Laboratório e foi realizado de acordo com os procedimentos de trabalho padrão do Centro de Toxicologia e Biomedicina, Santiago de Cuba. Resultados: Os extratos de Pleurotus ostreatus e a biopreparação de leveduras (0,5 mg/kg) não apresentaram sinais de pirogenicidade. Nos resultados da biopreparação (5,0 mg/kg), os valores de temperatura estão dentro de uma faixa de incerteza, segundo a Farmacopeia dos Estados Unidos (USP) e foi sugerido repetir o estudo. Conclusões: Os extratos de Pleurotus ostreatus e a biopreparação de Kluyveromyces marxianus (0,5 mg/kg) não induziram um aumento significativo da temperatura nos animais, o que sugere que não há níveis de endotoxinas nesses bioprodutos que possam causar pirogenicidade.

Potencial antioxidante de un extracto acuoso de hojas del NIM (Azadirachta Indica A. Juss) / Antioxidant potential of an aqueous leaf extract of Neem (Azadirachta Indica A. Juss)

INTRODUCCIÓN: la planta medicinal Azadirachta indica A. Juss conocida ancestralmente como el Árbol del Nim ha sido empleada desde la antigüedad para el tratamiento de múltiples afecciones, sin embargo, es en la actualidad con el desarrollo tecnológico que se han realizado las investigaciones científicas de sus propiedades terapéuticas. OBJETIVO: evaluar el potencial antioxidante de los extractos acuosos de hojas del Árbol del Nim. MÉTODOS: el extracto de las hojas secas del Nim se obtuvo empleando un equipo Soxhlet y fue caracterizado mediante un análisis fitoquímico preliminar y espectroscopia UV/VIS. El contenido de fenoles totales fue determinado por el ensayo de Folin-Ciocalteu y la determinación de la actividad antioxidante fue desarrollada por el método del reactivo de fosfomolibdeno. RESULTADOS: el espectro UV/VIS del extracto acuoso obtenido exhibe un máximo de absorción a las longitudes de onda 217 y 245 nm, característicos de los principios activos de la planta (azadiractina y nimbina). El contenido de fenoles del extracto de la planta expresados en equivalentes de ácido tánico fue de 54,87 mg/g y mostró una actividad antioxidante a través del ensayo del fosfomolibdeno (215,01 mmol/g), comparable al ácido ascórbico. CONCLUSIONES: los resultados obtenidos demuestran que las hojas Árbol del Nim son una fuente rica en compuestos fenólicos con propiedades antioxidantes y un candidato potencial para el desarrollo de nuevos fitofármacos.

INTRODUCTION: the medicinal plant Azadirachta indica A. Juss, traditionally known as neem tree, has been used since ancient times to treat numerous conditions. However, it is only at present and thanks to current technological development that scientific research has been conducted into its therapeutic properties. OBJECTIVE: evaluate the antioxidant potential of aqueous leaf extracts of the neem tree. METHODS: extract from neem dry leaves was obtained with a Soxhlet device and characterized by preliminary phytochemical analysis and UV/VIS spectroscopy. Total phenol content was determined by the Folin-Ciocalteu assay, and antioxidant activity by the phosphomolybdenum method. RESULTS: the UV/VIS spectrum of the aqueous extract exhibited an absorption peak at wavelengths of 217 and 245 nm, characteristic of the active principles in the plant (azadirachtin and nimbin). Phenol content expressed as tannic acid equivalents was 54.87 mg/g, revealing an antioxidant activity in the phosphomolybdenum assay of 215.01 mol/g, comparable to that of ascorbic acid. CONCLUSIONS: the results obtained show that neem leaves are a rich source of phenolic compounds with antioxidant properties, and a potential candidate for the development of new phytomedicines.

Abstinencia espontánea en ratones tratados con Mimosa pudica / Spontaneous abstinence in mice treated with Mimosa pudica

La planta Mimosa pudica (moriviví, como comúnmente se le conoce), ha sido empleada tradicionalmente como anestésico, antidepresivo, sedante, antialopécico, entre otras propiedades farmacológicas; sin embargo, en los últimos años su consumo se ha convertido en excesivo. Con el objetivo de conocer el potencial adictivo de esta planta se desarrolló un ensayo de abstinencia espontánea en ratones de la línea NMRI, llevado a cabo durante 20 días, para lo cual se administró una dosis de 1 000 mg/kg de peso de la decocción de la planta 2 veces al día, por vía oral. Como control negativo y positivo se emplearon agua y morfina (32 mg/kg de peso por vía intraperitoneal, respectivamente). Finalmente se comprobó que dicha decocción mostró signos de dependencia física y los animales en estudio manifestaron disminución del peso corporal y aumento de la temperatura rectal con respecto al control negativo, una vez suspendida la administración. Por su parte, estos signos fueron más significativos en el control positivo, de manera que se puede plantear que la decocción de la planta Mimosa pudica a la dosis empleada evidenció signos de dependencia física.

The plant Mimosa pudica (moriviví, as it is commonly known), has been traditionally used as anesthetic, antidepressant, sedative, antialopecic, among other pharmacological properties; however, in the last years its use has become excessive. With the objective of knowing the addictive potential of this plant a trial of spontaneous abstinence was developed in mice of the strain NMRI, carried out during 20 days, for which a dose of 1 000 mg/kg of weight of the decoction of the plant was administered orally twice at day. As negative and positive control water and morphine were used (32 mg/kg of weight intraperitoneally, in both cases). Finally, it was shown that this decoction showed signs of physical dependence and the animals in study showed a decrease of the body weight and an increase of the rectal temperature with regard to the negative control, once the decoction was discontinued. On the other hand, these signs were more significant in the positive control, so that it can be stated that the decoction of the plant Mimosa pudica evidenced signs of physical dependence with the used dose.

Efecto del adyuvante vacunal AFCo1 intranasal sobre la concentración plasmática de teofilina en ratas / Effect of intranasal vaccine adjuvant AFCo1 on plasma concentration of theophylline in rats

En este estudio se evaluó el efecto del adyuvante Finlay cocleato 1 (AFCo1), aplicado 4 veces por vía intranasal en 2 niveles de dosis (50 µg y 100 µg) sobre la concentración plasmática de teofilina, administrada a las 24 horas de la última aplicación (5 mg/kg, por vía intraperitoneal) en ratas Sprague-Dawley. Se empleó como control positivo de inflamación la aplicación de 2 dosis por vía subcutánea de adyuvante completo de Freund (ACF). Las ratas que recibieron AFCo1 no mostraron cambios significativos en la concentración sérica de teofilina; mientras que las tratadas con ACF desarrollaron inflamación local asociadas a signos de toxicidad a la teofilina y elevación de las cifras de inmunoglobulina G específica, de las concentraciones plasmáticas y el tiempo de vida media de teofilina en suero, en comparación con los grupos restantes. Estos resultados indican que la inmunoestimulación inducida por AFCo1 intranasal no incrementa los parámetros farmacocinéticos ni la toxicidad de la teofilina en el modelo empleado.

The effect of the adjuvant Finlay cochleate1 (AFCo1), applied intranasally 4 times in 2 dose levels (50 µg and 100 µg) on plasma concentration of theophylline administered 24 hours after the last application (5 mg/kg intraperitoneally) in Sprague-Dawley rats was evaluated in this study. Application subcutaneously of 2 doses of Freund's complete adjuvant (FCA) was used as positive control of inflammation. Rats receiving AFCo1 had no significant changes in serum theophylline concentration, while those treated with FCA developed local inflammation associated with signs of theophylline toxicity and increased specific G immunoglobulin, plasma concentrations and serum theophylline half-life as compared with the remaining groups. These results show that intranasal AFCo1-induced immunostimulation does not increase pharmacokinetic parameters and theophylline toxicity in the model used.

Toxicidad a dosis repetidas de Azadirachta indica A Juss (árbol del Nim) / Repeated dose toxicity in Azadichfa indica A Juss (Neem tree)

Azadirachta indica A Juss, conocida como árbol del Nim, tiene múltiples aplicaciones para la agricultura, la medicina veterinaria y la salud, es una especie vegetal de importancia relevante por su uso como antimicrobiano, antiparasitario e inmunoestimulante. OBJETIVO: detectar signos de toxicidad tras la administración diaria durante 28 d de la decocción de A. indica. MÉTODOS: se realizó un ensayo de toxicidad a dosis repetidas a una decocción de esta planta administrando una dosis de 1 000 mg/kg por vía oral a ratas Sprague Dawley durante 28 d. Se evaluaron los signos clínicos y el peso corporal de los animales en estudio y se realizaron exámenes de hematología, bioquímica sanguínea, análisis anatomopatológico e histopatológico. RESULTADOS: la decocción de la planta no produjo alteraciones significativas en el peso corporal, ni hubo signos clínicos indicadores de toxicidad. No se observaron alteraciones en los indicadores hematológicos y bioquímicos atribuibles a la sustancia de ensayo. Los resultados anatomopatológicos no mostraron alteraciones sobre sistemas, órganos y tejidos. CONCLUSIONES: el estudio no demostró efectos tóxicos en el modelo animal utilizado, que pudieran estar asociados a la administración repetida de la decocción de la planta A indica en las condiciones empleadas

Azadirachta indica A Juss, known as Neem tree, has various applications in agriculture, veterinary medicine and health care, thus it is a relevant vegetable species due to its antimicrobial, antiparasitic and immunostimulating properties. OBJECTIVE: to detect any signal of toxicity after daily oral administration of decoction for 28 days. METHODS: a repeated dose toxicity assay using a A. indica decoction at a dose of 1000 mg/kg, orally administered to Sprague Dawley rats for 28 days. Clinical signs and body weight of the study animals were evaluated together with hamatological, blood chemistry, anatomopathological and histopathological analyses. RESULTS: this decoction brought about neither significant change in the body weight nor clinical signs indicating toxicity. There were not altered hematological and biochemical indicators that may be attributed to the substance under testing. The anatomopathological results did not show any alteration upon systems, organs and tissues. CONCLUSIONS: the study did not reveal toxic effects in the animal model that might be connected with the repeated oral administration of A indica decoction under the study conditions

Toxicidad a dosis repetida de la decocción de Solanum torvum Sw (prendejera) en ratas / Toxicity by repeated doses of Solanum torvum Sw. decoction (prendejera) in rats

INTRODUCCIÓN: Solanum torvum Sw, comúnmente conocida en la zona oriental de Cuba como prendejera, pertenece a la familia Solanaceae y es muy empleada por sus propiedades medicinales tradicionales como antimicrobianas, antiartríticas y antiinflamatorias. OBJETIVOS: evaluar la toxicidad a dosis repetidas por 28 d de la decocción de hojas y tallos S torvum por vía oral en ratas. MÉTODOS: se realizó un ensayo de toxicidad a dosis repetida por el método de test límite por espacio de 28 d a una decocción de la planta S torvum a una dosis de 1 000 mg/kg, administrada por vía oral, de ratas Sprague Dawley. Se efectuaron exámenes de hematología, bioquímica sanguínea y análisis anatomopatológico e histopatológico correspondiente. RESULTADOS: no se observaron signos de toxicidad en los animales. No se reportaron afectaciones en el peso corporal. Los resultados del análisis histopatológico arrojaron ausencia de daños orgánicos ocasionados por la decocción evaluada y corroboraron los resultados antes expuestos. CONCLUSIONES: en las condiciones del ensayo, la decocción de hojas y tallos de S torvum no reportó reacciones tóxicas imputables a la sustancia ensayada

INTRODUCTION: Solanum torvum Sw, commonly known in Cuban eastern zone as prendejera, belongs to Solanaceae family and is very used due to its traditional medicinal properties as antimicrobial, antiarthritic and anti-inflammatory. OBJECTIVE: to assess the toxicity level by repeated doses for 28 days of leaves and stems decoction of S torvum by oral route in rats. METHODS: a toxicity trial was made in repeated doses by limit test method for 28 days in a decoction of S torvum in a 1 000 mg/kg dose, administered by oral route to Sprague Dawley rats. Hematology, blood Biochemistry examinations and anatomical and pathological and histopathological corresponding analyses were made. RESULTS: there were not toxicity signs in animals and no affectations in body weight. The results of histopathological analysis demonstrated the lack of organic damages provoked by the assessed decoction and corroborated the above results. CONCLUSIONS: in trial conditions, the decoction of leaves and stems of S. torvum there were not toxic reactions attributable to essayed substance

Identificación y prevención de riesgos de origen químico en centros laborales de Santiago de Cuba / Prevention and identification of chemical originated risks in workcenters in Santiago, Cuba

En el Servicio de Salud Ocupacional de TOXIMED, nos propusimos identificar los riesgos químicos presentes y analizar su interrelación con las condiciones de trabajo en once centros laborales. Se obtuvo información de la composición química de las sustancias, sus usos, peligrosidad y toxicidad, tiempo de exposición, la exposición directa e indirecta a las sustancias químicas, la protección personal, la higiene laboral, la presencia de ventilación natural o artificial y otras características técnicas del proceso productivo. Predominaron los hidrocarburos, los metales, los ácidos, y las sustancias básicas, hallándose un uso erróneo generalizado de derivados del petróleo. Se encontraron sustancias carcinogénicas, tóxicas por inhalación, corrosivas, irritantes, oxidantes, inflamables y una mutagénica. Con respecto a las condiciones laborales hubo una supremacía en la ausencia del equipamiento de protección individual (41.84 por ciento), luego el incumplimiento de las medidas de higiene (28,57por ciento), y por último se presentó el problema de la ventilación y el escape de sustancias químicas (16.32 por ciento). La Asesoría de Riesgo Laboral permitió considerar la peligrosidad de las sustancias empleadas y valorar cualitativamente los riesgos potenciales por puestos de trabajo, no antes valorado en estas entidades con un enfoque toxicológico, y el cumplimiento de las medidas recomendadas para el control de los riesgos estuvieron encaminadas a disminuir el impacto negativo de los riesgos de origen químico en a salud del trabajador.

Comportamiento de las enximas colinesterasa y alanin transaminasa en ratones B6D2F1 expuestos a fention / Enzimes cholinesterase and alanín transaminase Activities in mice B6D2F1 exposed to Fenthion

Las actividades enzimáticas de la colinesterasa y la Alanin Transaminasa, así como las pruebas histológicas de higado, fueron monitoreadas a las 0, 8, 16, 24 y 48 horas de administración de 80 mg/Kg. de Fention a ratones de la línea B6D2F1 via oral. En los resultados obtenidos se observó una inhibición significativa de la enzima colinesterasa y un aumento de la actividad Alanin Transaminasa en los grupos de ratones tratados con el insecticida, no encontrándose una correlación significativa entre los comportamientos de ambas enzimas. Los estudios histopatológicos de las muestras de hígados de los ratones tratados con Fentión corroboraron la presencia de daños celulares en este órgano(AB)